LumiTracker® Lyso Red

LumiTracker Lyso Red — флуоресцентный краситель, избирательно накапливается в клеточных органеллах с низким pH. В частности, он используется для селективного окрашивания лизосом живых клеток, которые поддерживают низкий уровень pH, то есть кислую среду, с помощью протонной помпы для эффективной работы гидролитических ферментов.

Данный краситель предназначен для витального окрашивания клеток, он свободно проникает через клеточную мембрану без использования дополнительных детергентов. Коровая часть структуры красителя относится к группе BDP и обладает выраженными гидрофобными свойствами, что обеспечивает хорошую проникающую способность красителя через мембрану клетки. Кроме этого, краситель содержит в своей структуре аминогруппу, которая выступает в роли слабого основания. В нейтральной среде она не полностью протонирована, и молекула красителя остается относительно нейтральной, что способствует лучшему проникновению через клеточную мембрану. Предположительно, попадая в лизосомы с кислой средой, краситель протонируется и таким образом удерживается в составе органеллы с низким pH.

Проникновение красителя в клетки происходит очень быстро, кроме этого, протонирование красителя способствует локальному защелачиванию, поэтому окрашивание живых клеток рекомендуется проводить не более 7 минут непосредственно перед визуализацией. Возможно фиксировать клетки после окрашивания, однако возрастает уровень неспецифического сигнала. В общем случае, несмотря на высокую селективность реагента в отношении лизосом, он рекомендуется для визуализации и не предназначен для подсчета числа лизосом.

LumiTracker Lyso Red имеет максимум поглощения при 577 нм и максимум флуоресценции при 590 нм. Для визуализации лизосом мы также предлагаем LumiTracker Lyso Green для зеленого канала (максимумы поглощения и флуоресценции при 504 и 511 нм, соответственно).

LumiTracker Lyso Red поставляется в виде 1 mM раствора в ДМСО.

Рекомендации по использованию красителя:

Рабочая концентрация: 50-75 нМ.*

Окрашивание: 3-7 минут при 37 °C в 1× PBS (непосредственно перед визуализацией, отдельным этапом при совместном окрашивании с другими красителями).

*в зависимости от клеточной линии может потребоваться увеличить концентрацию и/или время окрашивания.

LysoTracker™ — зарегистрированная торговая марка Molecular Probes Inc. в некоторых странах.