кПЦР с красителем dsGreen

Флуоресцентный интеркалирующий краситель dsGreen обладает очень высокой чувствительностью к наличию двухцепочечной ДНК и используется для неспецифической детекции амплификации ДНК в ПЦР «в реальном времени» (количественной ПЦР).

Если dsGreen хранился при температуре ниже 20 °С необходимо заранее его разморозить и хранить при комнатной температуре в темноте. Для быстрого оттаивания краситель можно инкубировать при температурах до 50 °С.
Рассчитайте объемы реагентов, необходимых для постановки реакции согласно протоколу производителя реагентов для ПЦР. Помните, что краситель dsGreen (100х в стоковой концентрации) должен быть разведен в смеси для ПЦР до 1х концентрации.
Приготовьте 1х смесь для ПЦР без образцов ДНК согласно протоколу производителя реагентов для ПЦР, добавьте необходимое количество dsGreen. Если Вы используете Taq-полимерзу без горячего старта, держите смесь для ПЦР на льду.
Поместите необходимое количество смеси для ПЦР в пробирки для ПЦР, добавьте образцы ДНК.
Проведите полимеразную цепную реакцию согласно инструкции к Вашему амплификатору.

Замечания:

При проведении ПЦР-анализа всегда используйте положительный и отрицательный контроли. Программа амплификации для количественной ПЦР не отличается от программы для стандартной ПЦР для конкретных праймеров/матрицы. Для детекции используйте канал FAM (для Rotor-Gene — зеленый канал). Для того, чтобы иметь возможность отличать специфический продукт амплификации от димеров праймеров добавьте в программу амплификации этап со съемкой кривой плавления ампликона.

Похожие товары

dsGreen для ПЦР реального времени, 100×

Флуоресцентный краситель для детекции амплификации в ПЦР реального времени в готовом 100×-растворе для добавления в мастер-микс.

Показать цены

Артикул	Фасовка	Цена	Срок поставки
A1010	50 uL	–	в наличии
11010	100 uL	$39	в наличии
41010	1 mL	$235	в наличии
71010	5 mL	$510	в наличии
91010	50 mL	$2670	в наличии