Набор для определения цитотоксичности и жизнеспособности клеток с помощью Calcein AM и EthD-1

Cell Viability and Cytotoxicity Kit, with Calcein AM and EthD-1 — готовый к применению набор для одновременной оценки жизнеспособности и цитотоксичности клеток на основе двойного флуоресцентного окрашивания.

Набор содержит два комплементарных индикатора:

• Calcein AM — неполярный, проникающий в живые клетки флуорогенный субстрат. Внутри клетки он гидролизуется цитозольными эстеразами с образованием ярко-зеленого флуоресцентного кальцеина, который удерживается в клетках с интактной мембраной. Интенсивность сигнала пропорциональна метаболической активности и количеству жизнеспособных клеток.
• Ethidium homodimer-1 (EthD-1) — высокоаффинный интеркалирующий краситель нуклеиновых кислот, непроникающий в живые клетки благодаря большому размеру молекулы и дикатионной природе. В клетках с нарушенной целостностью мембраны EthD-1 пассивно проникает в цитоплазму и ядро, где интеркалирует в двухцепочечные нуклеиновые кислоты (ДНК и РНК), сопровождаясь значительным усилением флуоресценции. Краситель служит индикатором погибших клеток и клеток на поздних стадиях апоптоза.

При совместной инкубации с клеточными культурами жизнеспособные клетки флуоресцируют зеленым (Calcein), тогда как погибшие и апоптотические — красным (EthD-1). Минимальное спектральное перекрытие позволяет проводить анализ в двухканальном режиме без сложных спектральных коррекций.