AF 430 в категории Красители

AF 430 — кумариновый краситель, с максимумом поглощения при 430 нм и эмиссией в зелено-желтой области спектра (максимум при 542 нм). Данный краситель — один из немногих, поглощение которых находится между возбуждаемыми УФ-излучением флуорофорами (например DAPI с максимумом возбуждения при 358 нм, AMCA/AMCA-X при ~350 нм) и флуоресцеином (максимум при 494 нм). AF 430 — фотостабильный и гидрофильный краситель: трифторметильная группа в его структуре уменьшает фотовыгорание, а сульфогруппы обеспечивают лучшую гидрофильность и более высокий квантовый выход в водных растворах. Краситель возбуждается фиолетовым лазером с длиной волны излучения 405 нм, при этом флуоресценция AF 430 не зависит от pH в широком диапазоне (pH 4–10).

AF 430 характеризуется большим сдвигом Стокса (112 нм), что делает его удобным инструментом для мультиплексных методов визуализации, в том числе широкопольной и конфокальной флуоресцентной микроскопии, STED-микроскопии и проточной цитофлуориметрии. Использование флуорофоров с большим сдвигом Стокса позволяет уменьшить число каналов возбуждения/детекции и при этом избежать перекрытия спектров флуоресценции совместно используемых красителей.

Краситель AF 430 фотостабилен и по этой причине подходит для применения в STED-микроскопии, где используются очень высокие интенсивности излучения. В STED-микроскопии краситель AF 430 с большим сдвигом Стокса комбинируется с красителем с малым сдвигом Стокса, при этом подавление излучения обоих флуорофоров производится при одной длине волны (для подавления флуоресценции AF 430 подходит лазер с длиной волны 660 нм).

Благодаря своим отличительным спектральным характеристикам, AF 430 используется в экспериментах FRET, как в сфере «наук о жизни», так и в материаловедении.