Мечение малеимидами белков и других тиолированных биомолекул
Реакция тиолов с малеимидами широко используется для биоконъюгации и мечения различных биомолекул, включая белки и пептиды. Реакция протекает по следующей схеме:
Малеимиды представляют собой электрофильные соединения, обладающие высокой селективностью по отношению к тиолам. Хотя малеимиды почти никогда не встречаются в природе, тиолы в ней очень распространены. В частности, они содержатся в белках и пептидах в виде остатков цистеина. Природная ДНК не содержит тиолов, однако, синтетические олигонуклеотиды с тиоловыми группами можно легко получить в лабораторных условиях.
Тиолы склонны к окислительной димеризации с образованием дисульфидных связей. Таким образом, остатки цистеина образуют дисульфидные мостики, которые стабилизируют третичные структуры белка. Дисульфиды, в отличие от тиолов, не способны реагировать с малеимидами, поэтому перед началом конъюгации необходимо восстановить дисульфиды и исключить кислород из реакции.
Протокол конъюгации зависит от растворимости исходных компонентов. Для соединений с низкой растворимостью в воде, например, большинства малеимидов флуоресцентных красителей, используют органические сорастворители, такие как ДМСО или ДМФА
Мы рекомендуем следующий протокол для конъюгации малеимидов красителей Lumiprobe с белками, пептидами и другими тиолированными биомолекулами.
- Растворите белок или другую молекулу, содержащую тиол и подлежащую мечению, в пластиковом флаконе с дегазированном буфером, pH 7–7,5 (подходят PBS, Tris, HEPES, либо другие буферы, не содержащие тиолы). Буфер можно дегазировать, применяя к нему вакуум в течение нескольких минут или барботируя через инертный газ (азот, аргон или гелий). Для белков обычно используют концентрации от 1 до 10 мг/мл.
- Добавьте во флакон избыток TCEP (трис-карбоксиэтилфосфина) для восстановления дисульфидных связей, продуйте смесь инертным газом и закройте флакон. Рекомендуется использовать 100-кратный молярный избыток TCEP. Инкубируйте смесь 20 мин при комнатной температуре.
- Растворите малеимид красителя в ДМСО или свежем ДМФА (1–10 мг в 100 мкл).
- Добавьте раствор малеимида красителя в раствор тиола (20-кратный избыток красителя), продуйте флакон инертным газом и плотно закройте.
- Тщательно перемешайте содержимое флакона и оставьте его на ночь при +4°С или при комнатной температуре.
- Очистите меченный продукт гель-фильтрацией, ВЭЖХ, ЖХБР или электрофорезом.
Для малеимидов с плохой растворимостью в воде, как и для большинства малеимидов красителей, мы рекомендуем использовать сорастворитель (ДМФА или ДМСО). Малеимиды с хорошей растворимостью в воде (например, sulfo-Cyanine-малеимиды) можно растворять непосредственно в воде. В случае выпадения осадка необходимо увеличить содержание органического сорастворителя в смеси, чтобы обеспечить лучший результат мечения.
Диализ рекомендуется в качестве средства очистки только для малеимидов с хорошей растворимостью в воде.
Похожие товары
3-Малеимидпропионовой кислоты NHS-эфир
Бифункциональный сшивающий агент, содержащий гидроксисукцинимидную (NHS), и малеимидную группы для конъюгации с аминами и тиолами.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 3419-100mg | 100 mg | – | в наличии | |
| 3419-500mg | 500 mg | $110 | в наличии |
AF 430 малеимид
AF 430 - краситель с эмиссией в желто-зеленой области. Относится к кумаринам. Это малеимидное производное для мечения тиольных групп биомолекул.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 10880 | 1 mg | $140 | в наличии | |
| 20880 | 5 mg |
$450
|
в наличии | |
| 40880 | 25 mg |
$1460
|
в наличии | |
| 50880 | 50 mg |
$1890
|
в наличии | |
| 60880 | 100 mg |
$2640
|
в наличии |
AF 488 малеимид
AF 488 С6 малеимид для мечения флуорофором AF 488 молекул, содержащих тиольную группу.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 11880 | 1 mg | $140 | в наличии | |
| 21880 | 5 mg |
$450
|
в наличии | |
| 41880 | 25 mg |
$1460
|
в наличии | |
| 51880 | 50 mg | по запросу | в наличии | |
| 61880 | 100 mg | по запросу | в наличии |
AF 647 малеимид
AF 647 малеимид — тиолреактивный дальнекрасный флуоресцентный краситель для маркировки тиол-содержащих биомолекул (белков, олигонуклеотидов и т. д.).
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 16880 | 1 mg | $140 | в наличии | |
| 26880 | 5 mg |
$450
|
в наличии | |
| 46880 | 25 mg |
$1460
|
в наличии | |
| 56880 | 50 mg |
$1890
|
в наличии | |
| 66880 | 100 mg |
$2990
|
в наличии |
BDP® 558/568 малеимид
Малеимидное производное бордипиррометенового красителя BDP 558/568, флуоресцирующего в желтой области, подходит для модификации тиольных групп в биомолекулах.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| A7480 | 1 mg | $125 | в наличии | |
| B7480 | 5 mg | $260 | в наличии | |
| C7480 | 10 mg | $325 | в наличии | |
| D7480 | 25 mg |
$510
|
в наличии | |
| E7480 | 50 mg |
$895
|
в наличии | |
| F7480 | 100 mg |
$1490
|
в наличии |
BDP® 581/591 малеимид
Малеимидное производное BDP 581/591 для конъюгации с тиолами. Флуорофор подходит для различных применений, включая микроскопию и флуоресцентно-поляризационный анализ.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 16480 | 1 mg | $125 | в наличии | |
| 26480 | 5 mg | $260 | в наличии | |
| 46480 | 25 mg |
$510
|
в наличии | |
| 56480 | 50 mg |
$895
|
в наличии | |
| 66480 | 100 mg |
$1490
|
в наличии |
BDP® 630/650 малеимид
BDP 630/650 малеимид - краситель, вступающий в реакцию с тиольными группами, и разработан специально для красного канала красителя Cyanine5. Его химическая основа - бордипиррометен
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 15480 | 1 mg | $125 | в наличии | |
| 25480 | 5 mg | $260 | в наличии | |
| 45480 | 25 mg |
$510
|
в наличии | |
| 55480 | 50 mg |
$895
|
в наличии | |
| 65480 | 100 mg |
$1490
|
в наличии |
BDP® 650/665 малеимид
Этот малеимид - реагент для модификации тиолов, производное BDP 650/665 - бордипиррометенового красителя для канала Cyanine5 (Cy5).
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 18480 | 1 mg | $125 | в наличии | |
| 28480 | 5 mg | $260 | в наличии | |
| 48480 | 25 mg |
$510
|
в наличии | |
| 58480 | 50 mg |
$895
|
в наличии | |
| 68480 | 100 mg |
$1490
|
в наличии |
BDP® FL малеимид
Малеимидное производное яркого и фотостабильного бордипиррометенового красителя для флуоресцеинового канала.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 11480 | 1 mg | $125 | в наличии | |
| 21480 | 5 mg | $260 | в наличии | |
| 41480 | 25 mg |
$510
|
в наличии | |
| 51480 | 50 mg |
$895
|
в наличии | |
| 61480 | 100 mg |
$1490
|
в наличии |
BDP® R6G малеимид
BDP R6G - бордипиррометеновый краситель для канала R6G (родамина 6G). Этот малеимид - функционализированный краситель для модификации тиольных групп в белках и других молекулах.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 14480 | 1 mg | $125 | в наличии | |
| 24480 | 5 mg | $260 | в наличии | |
| 44480 | 25 mg |
$510
|
в наличии | |
| 54480 | 50 mg |
$895
|
в наличии | |
| 64480 | 100 mg |
$1490
|
в наличии |
BDP® TMR малеимид
Яркий краситель для канала TAMRA с малеимидной функциональностью для модификации тиолов. Флуорофор BDP TMR особенно подходит для микроскопии и методов, детектирующих поляризацию флуоресценции.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 12480 | 1 mg | $125 | в наличии | |
| 22480 | 5 mg | $260 | в наличии | |
| 42480 | 25 mg |
$510
|
в наличии | |
| 52480 | 50 mg |
$895
|
в наличии | |
| 62480 | 100 mg |
$1490
|
в наличии |
BDP® TR малеимид
BDP TR - универсальный флуорофор, спектры поглощения и эмиссии которого соответствуют красителю ROX. Он пригоден для двухфотонных и поляризационных экспериментов.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 13480 | 1 mg | $125 | в наличии | |
| 23480 | 5 mg | $260 | в наличии | |
| 43480 | 25 mg |
$510
|
в наличии | |
| 53480 | 50 mg |
$895
|
в наличии | |
| 63480 | 100 mg |
$1490
|
в наличии |
Cyanine3B малеимид
Производное Cyanine3B, модификации красителя Cyanine3 с ещё более высоким квантовым выходом, для проведения тиол-малеимидной реакции.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 19380 | 1 mg | $250 | в наличии | |
| 29380 | 5 mg |
$450
|
в наличии | |
| 49380 | 25 mg |
$1750
|
в наличии |
Cyanine3 малеимид
Флуоресцентный краситель Cyanine3 для мечения тиольных групп в белках и пептидах.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 11080 | 1 mg | $125 | в наличии | |
| 21080 | 5 mg | $260 | в наличии | |
| 41080 | 25 mg |
$510
|
в наличии | |
| 51080 | 50 mg |
$895
|
в наличии | |
| 61080 | 100 mg |
$1490
|
в наличии |
Cyanine5.5 малеимид
Малеимидное производное флуорофора Cyanine5.5 - реагент для мечения тиольных (меркаптановых) групп в белках и пептидах.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 17080 | 1 mg | $125 | в наличии | |
| 27080 | 5 mg | $260 | в наличии | |
| 47080 | 25 mg |
$510
|
в наличии | |
| 57080 | 50 mg |
$895
|
в наличии | |
| 67080 | 100 mg |
$1490
|
в наличии |
Cyanine5 малеимид
Производное красителя Cyanine5, предназначенное для мечения тиольных групп, например остатков цистеина в белках и пептидах.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 13080 | 1 mg | $125 | в наличии | |
| 23080 | 5 mg | $260 | в наличии | |
| 43080 | 25 mg |
$510
|
в наличии | |
| 53080 | 50 mg |
$895
|
в наличии | |
| 63080 | 100 mg |
$1490
|
в наличии |
Cyanine7.5 малеимид
Реагент для мечения сульфгидрильных групп инфракрасным флуоресцентным красителем Cyanine7.5.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 16080 | 1 mg | $125 | в наличии | |
| 26080 | 5 mg | $260 | в наличии | |
| 46080 | 25 mg |
$510
|
в наличии | |
| 56080 | 50 mg |
$895
|
в наличии | |
| 66080 | 100 mg |
$1490
|
в наличии |
Cyanine7 малеимид
Краситель для ближней ИК-области, содержащий малеимидный фрагмент. Реагирует с тиолами, например с остатками цистеина в белках.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 15080 | 1 mg | $125 | в наличии | |
| 25080 | 5 mg | $260 | в наличии | |
| 45080 | 25 mg |
$510
|
в наличии | |
| 55080 | 50 mg |
$895
|
в наличии | |
| 65080 | 100 mg |
$1490
|
в наличии |
FAM малеимид, 6-изомер
Флуоресцеина (FAM) малеимид это краситель, реакционноспособный по отношению к тиогруппам. Получен из изомерно чистого 6-FAM. Флуоресцеин - это яркий краситель, совместимый со многими приборами и установками для флуоресцентных измерений.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 24180 | 5 mg | – | в наличии | |
| 44180 | 25 mg | $260 | в наличии | |
| 54180 | 50 mg | $370 | в наличии | |
| 64180 | 100 mg |
$525
|
в наличии |
ROX малеимид, 5-изомер
ROX малеимид - производное изомерно чистого флуорофора родамин X, содержащее малеимидный фрагмент для мечения тиольных (сульфгидрильных) групп.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 11280 | 1 mg | $110 | в наличии | |
| 21280 | 5 mg | $165 | в наличии | |
| 41280 | 25 mg | $285 | в наличии | |
| 51280 | 50 mg |
$495
|
в наличии | |
| 61280 | 100 mg |
$880
|
в наличии |
sulfo-Cyanine3 малеимид
Водорастворимый реагент - производное красителя sulfo-Cyanine3 для мечения тиольных групп антител и других белков.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 11380 | 1 mg | $115 | в наличии | |
| 21380 | 5 mg | $290 | в наличии | |
| 41380 | 25 mg |
$695
|
в наличии | |
| 51380 | 50 mg |
$1190
|
в наличии | |
| 61380 | 100 mg |
$1990
|
в наличии |
sulfo-Cyanine5.5 малеимид
sulfo-Cyanine5.5 - водорастворимый флуоресцентный краситель для дальней красной области. Это производное - малеимид, реагирующий с тиолами. Он рекомендован для мечения чувствительных белков, не совместимых с органическими сорастворителями.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 17380 | 1 mg | $125 | в наличии | |
| 27380 | 5 mg | $325 | в наличии | |
| 47380 | 25 mg |
$790
|
в наличии | |
| 57380 | 50 mg |
$1490
|
в наличии | |
| 67380 | 100 mg |
$1990
|
в наличии |
sulfo-Cyanine5 малеимид
Реагент для мечения белков, в том числе антител, красителем sulfo-Cyanine5 по сульфгидрильным группам.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 13380 | 1 mg | $115 | в наличии | |
| 23380 | 5 mg | $290 | в наличии | |
| 43380 | 25 mg |
$695
|
в наличии | |
| 53380 | 50 mg |
$1270
|
в наличии | |
| 63380 | 100 mg |
$1990
|
в наличии |
sulfo-Cyanine7.5 малеимид
sulfo-Cyanine7.5 - очень гидрофильный краситель для ближнего ИК-диапазона, предназначенный для имиджинга in vivo. Данный малеимид подходит для мечения сульфгидрильных групп в белках и пептидах.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 16380 | 1 mg | $115 | в наличии | |
| 26380 | 5 mg | $295 | в наличии | |
| 46380 | 25 mg |
$790
|
в наличии | |
| 56380 | 50 mg |
$889
|
в наличии | |
| 66380 | 100 mg |
$1385
|
в наличии |
sulfo-Cyanine7 малеимид
Водорастворимый реакционноспособный краситель, содержащий малеимидную группу. Предназначен для мечения белков и пептидов по тиольным группам.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 15380 | 1 mg | $115 | в наличии | |
| 25380 | 5 mg | $295 | в наличии | |
| 45380 | 25 mg |
$790
|
в наличии | |
| 55380 | 50 mg |
$1490
|
в наличии | |
| 65380 | 100 mg |
$1990
|
в наличии |
TAMRA малеимид, 5-изомер
Малеимидное производное TAMRA (тетраметилродамина) для мечения тиолов. Чистого 5-изомер красителя.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 17180 | 1 mg | $110 | в наличии | |
| 27180 | 5 mg | $210 | в наличии | |
| 47180 | 25 mg |
$410
|
в наличии | |
| 57180 | 50 mg |
$695
|
в наличии | |
| 67180 | 100 mg |
$1190
|
в наличии |
TAMRA малеимид, 6-изомер
TAMRA - хорошо известный ксантеновый флуорофор родаминового ряда. Это производное - малеимид для мечения белков и пептидов по SH-группам цистеина. Чистый 6-изомер.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 18180 | 1 mg | $110 | в наличии | |
| 28180 | 5 mg | $260 | в наличии | |
| 48180 | 25 mg |
$410
|
в наличии | |
| 58180 | 50 mg |
$695
|
в наличии | |
| 68180 | 100 mg |
$1190
|
в наличии |
Алкин малеимид
Малеимидный реагент для присоединения алкиновой группы к белкам, пептидам и другим молекулам, содержащим тиольную (SH)-группу - например, в составе цистеиновых фрагментов.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 41780 | 25 mg | $95 | в наличии | |
| 51780 | 50 mg | $175 | в наличии | |
| 61780 | 100 mg | $200 | в наличии |
Алкин-ПЭГ3-малеимид
Бифункциональный спейсер с алкинильной и малеимидной группами.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 2344-100mg | 100 mg | $140 | в наличии | |
| 2344-1g | 1 g |
$530
|
в наличии |
Алкин-ПЭГ4-малеимид
Водорастворимый, гидрофильный гетеробифункциональный линкер длиной 14 Å, содержащий малеимидную и алкиновую функциональные группы для мечения тиолов и клик-химии. Подходящий реагент для введения алкиновой группы в белки.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 2002-100mg | 100 mg | $150 | в наличии | |
| 2002-1g | 1 g |
$590
|
в наличии |
Биотин-X-малеимид
Тиол-реакционноспособный бифункциональный линкер для мечения белков, пептидов и других тиолированных молекул биотином.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 2896-25mg | 25 mg | $225 | в наличии | |
| 2896-100mg | 100 mg |
$850
|
в наличии |
ДБЦО-малеимид
Бифункциональный линкер, содержащий тиол-реакционноспособную малеимидную группу и дибензоциклооктиновый фрагмент, реагирующий с азидом.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 4448-100mg | 100 mg | $319 | в наличии | |
| 4448-500mg | 500 mg |
$1028
|
в наличии |
Пирен малеимид
Малеимидное производное пирена для мечения тиолов. Пирен примечателен среди других флуорофоров своей способностью к образованию эксимеров.
Показать цены
| Артикул | Фасовка | Цена | Срок поставки | Купить товар |
|---|---|---|---|---|
| 13580 | 1 mg | $110 | в наличии | |
| 23580 | 5 mg | $210 | в наличии | |
| 43580 | 25 mg |
$410
|
в наличии | |
| 53580 | 50 mg |
$695
|
в наличии | |
| 63580 | 100 mg |
$1190
|
в наличии |
Введено некорректное число товаров для добавления.
Корзина пуста
$ 
